原理

QuantiFast SYBR Green PCR Kit 縮減多至60%的PCR運(yùn)行時(shí)間（見圖“明顯縮減時(shí)間”），讓您可更快獲取結(jié)果。您也可以大幅度提高樣本通量，或通過與其他用戶共用PCR儀。試劑盒提供*的PCR緩沖夜，包含正在申請(qǐng)的添加劑Q-Bond，可縮減變性、退化和延伸時(shí)間（見圖 “引物快速退火”）。緩沖夜也包含HotStarTaq Plus DNA Polymerase，激活該聚合酶在95°C 的條件下只需5分鐘。可快速獲取PCR結(jié)果的同時(shí)絲毫不影響PCR的表現(xiàn)（見圖“在Applied Biosystems 7500 Fast System工作站上更快獲取結(jié)果，PCR表現(xiàn)有保障”）。

應(yīng)用QuantiFast SYBR Green PCR Kit可獲得高特異、高靈敏的結(jié)果，勝過快速循環(huán)模式下的其他 real-time PCR 試劑盒（見圖 “iCycler iQ上靈敏的兩步法RT-PCR”）。快速PCR緩沖夜中KCl和NH₄Cl 的平衡組合有利于特異引物的退火，支持高特異性的PCR。另外，HotStarTaq Plus DNA Polymerase 確保起始嚴(yán)謹(jǐn)，避免形成非特異性的產(chǎn)物。

確保對(duì)模板得多個(gè)稀釋倍數(shù)可精確定量分析靶分子。即使是差異較小的低拷貝也可有明顯的差異（見圖 “在Mastercycler ep realplex上小差異拷貝的分辨率”）。

過程

是即用型預(yù)混液，無需優(yōu)化反應(yīng)和循環(huán)條件。操作手冊(cè)提供可用于所有real-time PCR儀的操作程序。

2x QuantiFast SYBR Green PCR 預(yù)混液組分

2x QuantiFast SYBR Green PCR 預(yù)混液可儲(chǔ)存在2-8ºC，無需解凍反應(yīng)組分，可更快構(gòu)建反應(yīng)體系。

應(yīng)用

適用于任何real-time PCR儀，包括Applied Biosystems、Bio-Rad、Cepheid,、Corbett、Eppendorf、 Roche和Stratagene的儀器。

為了獲得*的real-time兩步法RT-PCR結(jié)果，我們推薦使用 QuantiTect Reverse Transcription Kit合成cDNA。該試劑盒可在20分鐘內(nèi)快速合成cDNA，同時(shí)去除基因組。除了QuantiTect Reverse Transcription Kit 還可應(yīng)用FastLane Cell cDNA Kit，該試劑盒可直接從培養(yǎng)細(xì)菌中制備cDNA，沒有純化RNA。如果只有少量的RNA模板，我們建議應(yīng)用QuantiTect Whole Transcriptome Kit制備cDNA存檔，該試劑盒可均一擴(kuò)增靶分子，確?？煽康幕虮磉_(dá)分析。

對(duì)于兩步法real-time RT-PCR我們也推薦QuantiTect Primer Assays ，這是全基因組的，多樣的，經(jīng)驗(yàn)證的引物系列。

對(duì)于普通PCR，我們推薦QIAGEN Fast Cycling PCR Kit，該試劑盒基于與QuantiFast Kits同樣的技術(shù)，可在任何PCR儀上實(shí)現(xiàn)快速、特異性PCR 。