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*提取條件的優(yōu)化研究

來源:   2007年08月14日 11:22   1805
摘要:香菇營(yíng)養(yǎng)豐富、味道鮮美,是我國(guó)傳統(tǒng)的藥食兩用食品。1957年,L.Hlueas首先開展了真菌抗腫瘤的研究,他發(fā)現(xiàn)美味牛肝菌的子實(shí)體提取液對(duì)小白鼠的肉瘤S180有明顯的抑制作用。
香菇營(yíng)養(yǎng)豐富、味道鮮美,是我國(guó)傳統(tǒng)的藥食兩用食品。1957年,L.Hlueas首先開展了真菌抗腫瘤的研究,他發(fā)現(xiàn)美味牛肝菌的子實(shí)體提取液對(duì)小白鼠的肉瘤S180有明顯的抑制作用。1968年,日本學(xué)者千原吳朗首先利用熱水從香菇子實(shí)體中分離出能抑制腫瘤的物質(zhì),并對(duì)其進(jìn)行了分析測(cè)定,證實(shí)此類物質(zhì)主要是一些高分子多糖(LNT),它能提高巨噬細(xì)胞的吞噬能力,誘導(dǎo)白細(xì)胞介素-l(IL-1)和腫瘤壞死因子(TNF)的生成;促進(jìn)T淋巴細(xì)胞增殖,誘導(dǎo)其分泌白細(xì)胞介素-2(IL-2);提高B淋巴細(xì)胞活性,增加多種抗體的分泌,增強(qiáng)機(jī)體的體液免疫調(diào)節(jié)功能,從而增強(qiáng)機(jī)體的抗病能力?,F(xiàn)有的研究表明[1-7]:*有多種生理功能,主要的有:免疫調(diào)節(jié)、抗突變、抗腫瘤、抗感染、抗疲勞、降血脂、降*、抗衰老等。*的提取主要是 通過水提醇沉法,但得率較低,本文擬通過正交試驗(yàn),優(yōu)化其提取條件,以提高其得率。 
1 材料和方法 
1.1實(shí)驗(yàn)材料 
1.1.1材料 
香菇:市售。 
1.1.2試劑: 
濃硫酸、*、葡萄糖(以上均為分析純)95%的食用乙醇。 
1.2試驗(yàn)方法 
1.2.1 多糖提取方法 
香菇→粉碎(60目)→蒸餾水浸提→過濾→上清液加3倍酒精沉淀多糖→離心(4000轉(zhuǎn)/分)→蒸餾重溶解→測(cè)定。 
1.2.2測(cè)定方法 
*一硫酸法[8]。 
1.2.3 試驗(yàn)設(shè)計(jì) 
現(xiàn)有的研究結(jié)果表明,影響多糖提取得率的主要因素有:溫度、時(shí)間、料水比等。根據(jù)預(yù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果,選擇料水比、浸提溫度、浸提時(shí)間3項(xiàng)為考察因素,各取3個(gè)水平,進(jìn)行(33)正交試驗(yàn)設(shè)計(jì)(見表1)。 
表1 因素水平表 
Table 1 Test design of factor and level 
A 料水比 B 浸提時(shí)間/hC浸提溫度/0C
2.結(jié)果 
正交試驗(yàn)結(jié)果見表2,方差分析結(jié)果見表3。 
表2 正交試驗(yàn)結(jié)果 
Table 2 Orthogonal test and results 
料水比浸提時(shí)間/h浸提溫度/0C多糖得率/% 
極差的大小可以反應(yīng)各因素對(duì)指標(biāo)影響程度,根據(jù)表2和圖1的極差分析,可排列出試驗(yàn)因素的主次順序如下: C (浸提溫度)>A(料水比)> (浸提時(shí)間) B,從表2正交試驗(yàn)結(jié)果和極差分析可知, 因素A第2水平為,因素B第2水平為,因素C以第3水平為,因此*水平搭配為A2B2C3。 
表3 方差分析表 
Table 3 Analysis of variance 
變異來源 平方和 自由度 均方 顯著水平 
圖1 各因素水平對(duì)多糖提取得率的影響 
Fig.1 The influence of factor and level on the polysaccharides extraction ratio 
從表2的正交實(shí)驗(yàn)結(jié)果和表3的方差分析可知,浸提溫度(C)是影響多糖提取得率的zui主要因素。*主要存在于香菇細(xì)胞中,在一定的溫度范圍內(nèi),提取溫度的提高能加快香菇細(xì)胞壁的破碎,提高香菇細(xì)胞壁的破碎率,從而有利于*的溶出,提高多糖的提取得率。從本次實(shí)驗(yàn)所設(shè)的三個(gè)提取溫度也可看出,隨著提取溫度的提高,提取得率也逐漸增加,各水平之間的差別達(dá)到極顯著水平,提取溫度100℃為*提取溫度。當(dāng)然,100℃的提取溫度正好處在本次實(shí)驗(yàn)所設(shè)計(jì)溫度的臨界點(diǎn),進(jìn)一步提高提取溫度,多糖提取得率可能還能提高,但過高的提取溫度會(huì)破壞多糖結(jié)構(gòu)、使有些多糖發(fā)生降解而影響其生物活性,而且在實(shí)際生產(chǎn)中,過高的溫度會(huì)增加能耗和設(shè)備的投入,因此多糖的提取溫度多采用100℃下的溫度,故可以認(rèn)為100℃的提取溫度就是*的*提取溫度。料水比(A)也是影響多糖提取得率的主要因素,本次實(shí)驗(yàn)所設(shè)的三個(gè)料水比中,以"1∶20"為,料水比太高和太低均會(huì)影響得率。料水比太低會(huì)使提取溶液液粘度太高,香菇粉難以與水充分混合,造成香菇粉吸水不充分,不利于香菇細(xì)胞中的多糖溶出,從而降低多糖的提取得率。料水比太高會(huì)使提取液中多糖濃度太低,而且會(huì)增加后續(xù)工藝中的提取液的濃縮成本和醇沉中的酒精用量。本實(shí)驗(yàn)所設(shè)的提取時(shí)間(B)各水平之間也達(dá)到了顯著水平。以提取時(shí)間6小時(shí)較好。提取時(shí)間太短不利于香菇細(xì)胞的破碎和多糖的溶出,從而降低多糖提取得率。提取時(shí)間太長(zhǎng)會(huì)使多糖在高溫提取過程中的時(shí)間過長(zhǎng),而使部分多糖破壞和降解,降低多糖的得率。因此6小時(shí)為*提取時(shí)間。 
3 結(jié)論 
本試驗(yàn)的結(jié)果表明溫度是影響*提取得率的zui主要因素,達(dá)到了極顯著水平,浸提時(shí)間、料水比也是影響提取得率的主要因素之一,達(dá)到了顯著水平。對(duì)*進(jìn)行*提取條件優(yōu)化的研究表明:料水比為1∶20,浸提溫度為100℃,浸提時(shí)間為6h為*提取條件。 
參考文獻(xiàn) 
1 王健、龔興國(guó).多糖的抗腫瘤及免疫調(diào)節(jié)研究進(jìn)展[J].中國(guó)生化藥物雜志.2001,22(1):52-54. 
2 方積年、王順春.*的研究進(jìn)展[J].中國(guó)藥學(xué)雜志.1997,32(6):332-334. 
3 周鵬、謝明勇.多糖的生物活性[J].食品研究與開發(fā).2001,22(2):6-8. 
4 楊娟、吳謀成、張聲華等.香菇蛋白多糖抗疲勞作用研究[J].營(yíng)養(yǎng)學(xué)報(bào).2001,23(4):350-353. 
5 羅諱、李東.*的研究進(jìn)展[J].食品與發(fā)酵工業(yè).2000,26(4):63-67. 
6 秦思昌、孫云漢.香菇的保健作用[J].食品研究與開發(fā)[J].2003,24( 4):88-90. 
7 李丹、尚紅、姜擁軍等.*體外抗HIV的免疫調(diào)節(jié)作用的實(shí)驗(yàn)研究[J].中國(guó)免疫學(xué)雜志 2004.20(4) 252-255. 
8 于村、丁鋼強(qiáng)、俞莎等.*測(cè)定的方法學(xué)研究[J].中國(guó)公共衛(wèi)生2000,16(3):245-246.
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