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細胞計數(shù)專題 | 熒光染料誘導的微生物培養(yǎng)基背景信號分析

來源：廣州虹科電子科技有限公司   2025年06月21日 13:01   17

隨著點成微生物細胞計數(shù)儀 QUANTOM Tx™的推出，基于單細胞水平的細菌計數(shù)方法正在逐步取代傳統(tǒng)、耗時的 CFU/ml 測定。該儀器利用細胞膜通透性，借助熒光染料對細菌核酸進行染色，可在幾分鐘內快速完成準確計數(shù)。

在微生物培養(yǎng)過程中，需根據(jù)菌種特性、生長條件及研究目標選擇合適的培養(yǎng)基。盡管常規(guī)培養(yǎng)基本身不具備自發(fā)熒光特性，但其成分可能與熒光染料發(fā)生相互作用，進而導致背景熒光增強，影響信號判讀。因此，建議實驗前將培養(yǎng)基（如添加了點成 QUANTOM™ 總細胞染色液）與熒光染料混合，評估背景噪聲水平差異，以優(yōu)化實驗條件。

結果與討論

本研究所測試培養(yǎng)基包括：營養(yǎng)肉湯（NB）、魯里亞-貝爾塔尼（LB）肉湯、無羊血的大豆肉湯（TSB）、含羊血的大豆肉湯（TSB-SB）、酵母提取物蛋白胨葡萄糖（YPD）培養(yǎng)基、de Man-Rogosa-Sharpe（MRS）培養(yǎng)基。

圖1 顯示培養(yǎng)基與QD試劑按1:10混合后的背景信號變化（A：GFP信號對比蒙太奇圖；B：柱狀圖量化分析）

未添加點成QUANTOM™總細胞染色液時，各培養(yǎng)基均未檢測到自發(fā)熒光背景信號。添加染色液后所有培養(yǎng)基均出現(xiàn)背景信號增強現(xiàn)象，其中MRS培養(yǎng)基背景噪聲顯著。建議實驗操作時避免將熒光染料直接與培養(yǎng)基混合，而應使用PBS緩沖液稀釋培養(yǎng)細胞，以消除背景熒光干擾。

產(chǎn)品詳情

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