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微生物限度薄膜過濾器薄膜過濾法所采用的濾膜孔徑應不大于0.45μm,直徑一般為50mm,若采用其他直徑的濾膜,沖洗量應進行相應的調(diào)整。供試品及其溶劑應不影響濾膜材質(zhì)對微生物的截留。薄膜過濾器濾器及濾膜使用前應采用適宜的方法滅菌。使用時,應保證濾膜在過濾前后的完整性。水溶性供試液過濾前先將少量的沖洗液過濾以潤濕濾膜。油類供試品,其濾膜和濾器在使用前應充分干燥。為發(fā)揮濾膜的zui大過濾效率,應注意保持供試品溶液及沖洗液覆蓋整個濾膜表面。供試液經(jīng)薄膜過濾后,若需要用沖洗液沖洗濾膜,每張濾膜每次沖洗量一般為100ml。
總沖洗量不得超過1000ml,以避免濾膜上的微生物受損傷。 取照上述“供試液的制備” “接種和稀釋” 和“抗菌活性的去除或滅活” 制備的供試液適量(一般取相當于1g、1ml或10c㎡的供試品,若供試品中所含的菌數(shù)較多時,供試液可酌情減量),加至適量的稀釋液中,混勻,過濾。用適量的沖洗液沖洗濾膜。 若測定需氧菌總數(shù),轉(zhuǎn)移濾膜菌面朝上貼于胰酪大豆胨瓊脂培養(yǎng)基平板上;若測定霉菌和酵母總數(shù),轉(zhuǎn)移濾膜菌面朝上貼于沙氏葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基平板上。按表1規(guī)定條件培養(yǎng)、計數(shù)。每株試驗菌每種培養(yǎng)基至少制備一張濾膜。同法測定供試品對照組及菌液對照組菌數(shù)。
1、松開底部圓螺母,提起金屬固定架,取出玻璃桶,在多孔墊板下放置橡膠墊圈,在墊板上放置聚四氟乙烯。
2、將一根橡膠管連接到底部排水噴嘴,并用紗布或其他東西包裹噴嘴;
3、將整個過濾器用其底座包裹,在121度蒸汽滅菌后使用;
4、加入液體樣品,可通過滅菌器注入,滲透到橡膠板中,注入到過濾器中,加入固體和半固體樣品,可通過展開式直接加入到過濾器中;
5、使用封閉式培養(yǎng)時,請參考儀器的操作說明。
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