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新技術(shù)檢測沙門氏菌的利器

來源:   2008年07月25日 10:57   823
    一種新型的基于納米技術(shù)的生物傳感器在高度準(zhǔn)確檢測沙門氏菌等食源性病原菌方面正顯示出巨大的潛力。

  美國食品藥品管理局已經(jīng)發(fā)行了一本名為《有害病菌名錄》(Bad Bug Book)的手冊。該手冊提供了關(guān)于食源性致病微生物和天然毒素的基本情況,其中包含所有人們想了解的有關(guān)沙門氏菌、大腸埃希氏菌、原生寄生生物、蠕蟲、病毒、天然毒素和其他有毒物質(zhì)的信息。當(dāng)你吃下的漢堡包中含有這些物質(zhì)時,它們會使你生病難受,甚至?xí)媚阌谒赖?。疾病防控中心(CDC)持有的統(tǒng)計資料令人感到恐懼。據(jù)估計,在美國食源性病原體每年會造成約7600萬人發(fā)病,32.5萬人住院,5000人死亡。

  沙門氏菌、李氏桿菌和弓形蟲這三種病原微生物每年會引起1500人死亡。沙門氏菌是造成食源性死亡zui常見的原因,每年會引發(fā)數(shù)百萬例食源性疾病。沙門氏菌來源于生的或未煮熟的雞蛋、半生不熟的畜禽肉、奶制品、海產(chǎn)品、水果和蔬菜——幾乎包括我們所有的食物。因此,對食源性致病菌(特別是沙門氏菌)的早期檢測是進(jìn)行微生物學(xué)分析、保證食品安全的重要任務(wù)??茖W(xué)家已經(jīng)開發(fā)了多種檢測該病原體的方法;然而,檢測速度和靈敏度仍然是zui大的挑戰(zhàn)。一種新型的基于納米技術(shù)的生物傳感器在高度準(zhǔn)確檢測食源性病原菌方面正顯示出巨大的潛力。

  美國農(nóng)業(yè)部的農(nóng)業(yè)工程師博森·帕克(Bosoon Park)表示:“對食源性致病菌的早期檢測是預(yù)防疾病爆發(fā)和保證公共衛(wèi)生安全的關(guān)鍵。目前的檢測技術(shù),例如ISO6579法、熒光抗體技術(shù)(FA)、酶聯(lián)免疫吸附反應(yīng)(ELISA)、聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(PCR)等,不但耗時、繁瑣,而且靈敏度低?!?nbsp;帕克還是由喬治亞大學(xué)和韓國食品研究所的科學(xué)家組成的科學(xué)團(tuán)隊成員,該團(tuán)隊研究出了一種新型的檢測食源性細(xì)菌的有效方法。

  喬治亞大學(xué)物理系副教授趙義平博士表示:“我們基于納米技術(shù)的生物傳感器在高靈敏度和高準(zhǔn)確性地檢測蛋白質(zhì)、病毒和細(xì)菌方面顯示了巨大的潛力。這種仿生異質(zhì)納米棒檢測方法在食品安全行業(yè)和生物醫(yī)學(xué)診斷方面具有巨大的潛力?!?

  該研究小組還包括喬治亞大學(xué)傳染病系的拉爾夫·特瑞普(Ralph A. Tripp)博士。他們通過掠射角沉積技術(shù)(GLAD)制備薄膜法構(gòu)造了異質(zhì)結(jié)構(gòu)的硅/金納米棒陣列,并使用抗沙門氏菌抗體和有機(jī)染料分子使其功能化。由于硅納米棒高厚徑比大,附著在硅納米棒上的染料分子在捕獲和檢測沙門氏菌時能夠產(chǎn)生強(qiáng)熒光。

  帕克認(rèn)為,傳統(tǒng)的用于檢測食源性病原體的微生物技術(shù)(如ISO 6579法)通常需要5天時間才能獲得陽性結(jié)果,其過程包括預(yù)培養(yǎng)、選擇培養(yǎng)和菌落鑒定,這些操作既耗時又費力。傳統(tǒng)培養(yǎng)方法的另一個缺點是對低污染水平的樣本靈敏度差。

  很多研究人員已使用了熒光抗體技術(shù)(FA)檢測沙門氏菌。雖然熒光抗體技術(shù)能夠節(jié)約時間,但為了觀察到可檢測的熒光信號,它要求樣本中要有足夠多的病原體。這常常意味著增菌培養(yǎng)技術(shù)要優(yōu)先于免疫熒光顯微鏡技術(shù)。因此,熒光抗體技術(shù)尚未成為檢測沙門氏菌的常規(guī)方法。

  納米技術(shù)在設(shè)計可靠檢測食源性病原體的傳感器方面正發(fā)揮越來越大的作用。趙義平教授說:“所有用于生物傳感的納米結(jié)構(gòu)都有兩個特點。首先,它們具有某些針對被分析物的識別機(jī)制,例如抗體或酶。其次,它們能夠從被分析物中產(chǎn)生特定的信號,并且這種信號能夠由納米結(jié)構(gòu)自身產(chǎn)生或者由固定或包含在納米結(jié)構(gòu)中的信號分子產(chǎn)生?!?

  傅俊學(xué)是趙義平教授研究小組的一名研究生,他指出,單組分納米結(jié)構(gòu)很難同時固定識別分子和信號分子。而異質(zhì)納米結(jié)構(gòu)則為解決這一問題提供了良好的平臺。因此,不同功能的分子能夠被固定在異質(zhì)納米結(jié)構(gòu)的不同組分上,從而增強(qiáng)檢測的靈敏度和特異性。在實驗中,趙義平教授成功地利用連接在金納米棒上的抗體捕獲了單個沙門氏菌,并被固定在硅納米棒上的大量染料分子檢測。

  大體上,如果選擇合適的抗體與納米棒上的底物相連,則本項研究的結(jié)果能夠被用于檢測其他食源性致病菌,如大腸埃希氏菌、葡萄球菌,以及食物毒素。此外,熒光檢測染料還能夠被其他類型的染料或量子點替代,進(jìn)行多重檢測。

  這種新型的納米生物傳感器可以被廣泛用于食品工業(yè)、食品安全檢測機(jī)構(gòu)、政府食品安全監(jiān)管機(jī)構(gòu)和從事食品安全與生物安全的研究人員。
關(guān)鍵詞:傳感器 顯微鏡
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