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凝膠成像,經(jīng)典知識(shí)剖析(二)

閱讀：45發(fā)布時(shí)間：2024-9-23

那么下面上海金鵬分析儀器有限公司為大家簡(jiǎn)單介紹一下凝膠成像，經(jīng)典知識(shí)剖析（二）：

一. 多種光源可選
 一般的凝膠成像系統(tǒng)，提供 302nmUV、254nmUV、365nmUV、藍(lán)光及白光光源。
① 安全防護(hù)隔離
觸摸控制電源開(kāi)關(guān)、光源控制、光圈、聚焦等觀察和拍攝工作，實(shí)現(xiàn)污染現(xiàn)場(chǎng)和電腦操作現(xiàn)場(chǎng)隔離，防止交叉污染，確保操作者安全，抽屜式樣品載物臺(tái)，方便取放樣品。
② 直接切膠

凝膠成像系統(tǒng)也可直接切膠，操作應(yīng)遵循說(shuō)明書(shū)的指示，尤其注意對(duì)激發(fā)光源（無(wú)論是紫外，光或者藍(lán)光）進(jìn)行相應(yīng)的防護(hù)。

二. 應(yīng)用范圍  
從整體總的來(lái)說(shuō)凝膠成像（系統(tǒng)）可應(yīng)用于：蛋白質(zhì)、核酸、多肽、氨基酸、多聚氨基酸等其他生物分子的分離純化結(jié)果作定性分析
① 分子量定量
對(duì)于一般常用的DNA膠片,利用分子量定量功能,通過(guò)對(duì)膠上DNA Marker條帶的已知分子量注釋,自動(dòng)生成擬合曲線,并以它衡量得到未知條帶的分子量。通過(guò)這種方法所得到的結(jié)果較肉眼觀察估計(jì)要準(zhǔn)確很多。
② 密度定量
一般常用的測(cè)定DNA(脫氧核糖核酸)和RNA(核糖核酸)濃度的方法是紫外吸收法,但它只能測(cè)定樣品中的總核苷酸濃度,而不能區(qū)分各個(gè)長(zhǎng)度片段的濃度。利用凝膠成像系統(tǒng)和軟件,先將DNA膠片上某一已知其DNA含量的標(biāo)準(zhǔn)條帶進(jìn)行密度標(biāo)定以后,可以方便的單擊其他未知條帶，根據(jù)與已知條帶的密度做比較，可以得到未知DNA的含量。此方法也適用于對(duì)PA GE蛋白膠條帶的濃度測(cè)定。
③ 密度掃描
在分子生物學(xué)和生物工程研究中，我們*常用到的是對(duì)蛋白表達(dá)產(chǎn)物占整個(gè)菌體蛋白的百分含量的計(jì)算。傳統(tǒng)的方法就是利用專(zhuān)用的密度掃描,但利用生物分析軟件結(jié)合現(xiàn)在實(shí)驗(yàn)室常規(guī)配備的掃描儀或者直接用白光照射的凝膠成像就能完成此項(xiàng)工作。
④ PCR定量
PCR定量主要是指，如果PCR實(shí)驗(yàn)擴(kuò)增出來(lái)的條帶不是一條，那么可以利用軟件計(jì)算出各個(gè)條帶占總體條帶的相對(duì)百分?jǐn)?shù)。就此功能而言，與密度掃描類(lèi)似，但實(shí)際在原理上并不相同。PCR定量是對(duì)選定的幾條帶進(jìn)行相對(duì)密度定量并計(jì)算其占總和的百分?jǐn)?shù)，密度掃描時(shí)并對(duì)選擇區(qū)域生成縱向掃描曲線圖并積分。

圖像處理界面

凝膠成像結(jié)果

三. 注意事項(xiàng)
   1、開(kāi)關(guān)抽屜時(shí)防止將EB沾在抽屜或暗箱上，如不慎沾上EB，擦干后用水沖洗；
   2、透射板紫外燈壽命有限，調(diào)整圖象后及時(shí)成像； 
   3.、若長(zhǎng)時(shí)間不進(jìn)行操作，機(jī)箱總電源將在10分鐘后關(guān)閉；
   4、拍攝時(shí)，請(qǐng)注意不要將過(guò)量的緩沖液傾倒在投射底座上；
   5、凝膠應(yīng)及時(shí)清理，防止凝膠固化后貼附在透射板上，造成成像不清晰；
   6、實(shí)驗(yàn)完畢以后請(qǐng)不要將暗箱式抽屜關(guān)閉，以保證暗箱內(nèi)空氣暢通；
   7、請(qǐng)勿用該電腦處理文檔等，如需拷貝圖片，請(qǐng)將移動(dòng)盤(pán)格式化后再插入；
   8、請(qǐng)注意保管好軟件和軟件光盤(pán)，以免遺失。

以上就是上海金鵬分析儀器有限公司為大家整理總結(jié)關(guān)于凝膠成像 經(jīng)典知識(shí)剖析（二）。
我們上海金鵬分析儀器有限公司是專(zhuān)業(yè)生產(chǎn)超蛋白純化系統(tǒng)、超微量核酸蛋白測(cè)定儀、化學(xué)發(fā)光成像系統(tǒng)、凝膠成像分析系統(tǒng)、紫外分析儀、核酸蛋白檢測(cè)儀、紫外檢測(cè)儀、光化學(xué)反應(yīng)儀、旋渦混合器、恒流泵、自動(dòng)部分收集器等為核心的十幾個(gè)產(chǎn)品系列的廠家，歡迎大家前來(lái)訂購(gòu)


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