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技術(shù)文章

蛋白層析系統(tǒng)操作步驟及注意事項(xiàng)

閱讀：150發(fā)布時(shí)間：2024-9-15

蛋白層析系統(tǒng)是一種常用的分離和純化蛋白質(zhì)的方法，操作步驟及注意事項(xiàng)如下：

蛋白層析系統(tǒng)

操作步驟：

  1. 準(zhǔn)備工作：準(zhǔn)備好所需的層析柱、層析緩沖液、蛋白樣品、洗滌緩沖液、洗脫緩沖液等試劑和設(shè)備。
  2. 樣品加載：將蛋白樣品加載到層析柱中，注意樣品加載量不要過(guò)多，以避免超載。
  3. 洗滌：使用洗滌緩沖液洗脫非特異性結(jié)合的蛋白質(zhì)，保持洗滌液的流速穩(wěn)定。
  4. 洗脫：使用洗脫緩沖液逐步洗脫目標(biāo)蛋白質(zhì)，收集洗脫液中的目標(biāo)蛋白質(zhì)。
  5. 收集：收集洗脫液中的目標(biāo)蛋白質(zhì)，注意避免交叉污染和樣品損失。
  6. 分析：對(duì)收集的目標(biāo)蛋白質(zhì)進(jìn)行分析，如SDS-PAGE凝膠電泳、Western blot等。

注意事項(xiàng)：

  1. 保持實(shí)驗(yàn)環(huán)境清潔整潔，避免交叉污染。
  2. 嚴(yán)格按照操作步驟進(jìn)行，避免操作失誤。
  3. 注意層析柱的使用壽命和保養(yǎng)，及時(shí)更換老化的層析柱。
  4. 注意控制洗滌和洗脫緩沖液的pH值和離子強(qiáng)度，以保證蛋白質(zhì)的穩(wěn)定性。
  5. 注意避免氣泡的產(chǎn)生，以保證流速的穩(wěn)定性。
  6. 注意收集的目標(biāo)蛋白質(zhì)的保存條件，避免蛋白質(zhì)降解或失活。

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